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產(chǎn)品簡介 

  1.中文名：支原體檢測試劑盒 

  2.產(chǎn)品內(nèi)容  Hoechst 33258 工作液 50ml 

              固定液  50ml 

              抗熒光衰減封片液  10ml 

              說明書  1 份 

 3.貨  號：CA1080

 4.品  牌：solarbio

 5.儲存條件：4℃保存，有效期為 2 年，Hoechst 工作液需要避光保存。

 6.用  途 :

    本試劑盒是利用熒光染料（bisbenzimide,Hoechst 33258）檢測支原體污染。這種染料會結(jié)合到 DNA的 A-T 富集區(qū)域，因為支原體的 DNA 中 A-T 含量高（55％～80％），所以可將其染色而被檢測到。被支原體污染的細(xì)胞經(jīng)染色后在細(xì)胞周圍可看到許多大小均一的熒光小點，即為支原體的 DNA染色斑，說明有支原體污染。Hoechst 33258 的大激發(fā)波長為 346nm，大發(fā)射波長為 460nm；Hoechst 33258 和雙鏈DNA結(jié)合后，大激發(fā)波長為 352nm，大發(fā)射波長為 461nm。 

操作步驟：   

貼壁細(xì)胞： 

1、被檢細(xì)胞接種于無菌的 6 孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，接種密度為 1-2×104。同時，接種正常無支原體感染的同種細(xì)胞，作為陰性對照。 

2、5 天后，先吸去培養(yǎng)液，再加入 1ml 的固定液，靜置 20min， 

3、吸去固定液，晾干。 

4、于每孔中，加入 1ml 的 Hoechst33258 工作液（Hoechst 33258 工作液須覆蓋全部被檢細(xì)胞），37℃避光放置 15-20min 或室溫靜置 20～30min。 

5、吸去 Hoechst 33258 工作液，加入 2ml 滅菌超純水洗滌三次，直接風(fēng)干。風(fēng)干后加入一滴封片液，并以蓋玻片覆蓋。 6、熒光顯微鏡觀察。用紫外激發(fā)光激發(fā)，觀察細(xì)胞周圍是否有藍色熒光小點或串珠狀熒光小點。 

懸浮細(xì)胞： 

1、收集需檢測的細(xì)胞，1500rpm，5min。 

2、將收集的細(xì)胞涂片于載玻片上，再加 1ml 的固定液，靜置 20min。 

3、吸去固定液，晾干。 

4、于每孔中，加入 1ml 的 Hoechst33258 工作液（Hoechst 33258 工作液須覆蓋全部被檢細(xì)胞），37℃避光放置 15～20min 或室溫靜置 20～30min。 

5、吸去 Hoechst 33258 工作液，用無菌水洗滌玻片 3 次，直接風(fēng)干。風(fēng)干后加入一滴封固液，并以蓋玻片覆蓋。 

6、熒光顯微鏡觀察。用紫外激發(fā)光激發(fā)，觀察細(xì)胞周圍是否有藍色熒光小點或串珠狀熒光小點。   

公司簡介 

     北京索萊寶科技有限公司 始創(chuàng)于 2000年， 是一家集 產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的大型高科技生物企業(yè)。  公司總部位于北京，擁有1200平米研發(fā)生產(chǎn)中心，公司提供的產(chǎn)品近萬種，超過5000種常備現(xiàn)貨，涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域，并不斷推陳新出擴充種類，為用戶提供優(yōu)秀，專業(yè)的產(chǎn)品。  立足北京，輻射全國，隨著產(chǎn)品營銷戰(zhàn)略的不斷延伸，我們將逐步發(fā)展成為專業(yè)性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起，利用各自的資源優(yōu)勢和勇于進取的敬業(yè)精神，為中國生命科學(xué)研究的發(fā)展作出更多的貢獻。為了更好、更全面的發(fā)展，現(xiàn)公司正在誠招各地代理商，歡迎垂詢并期待您的加入！