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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | 索萊寶 |
貨號 | C0020 |
用途 | 穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料 |
包裝規(guī)格 | 10ml |
CAS編號 | 23491-45-4 |
純度 | 533.88% |
是否進(jìn)口 | 否 |
Hoechst 33258,也稱bisBenzimide H 33258或HOE 33258,是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,對細(xì)胞的毒性較低。Hoechst 33258染色常用于細(xì)胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測。Hoechst 33258也常用于普通的細(xì)胞核染色,或常規(guī)的DNA染色。Hoechst 33258的*激發(fā)波長為346nm,*發(fā)射波長為460nm;Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后,*激發(fā)波長為352nm,*發(fā)射波長為461nm。本Hoechst 33258染色液可直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色,也可直接用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。
使用說明: 1. 對于固定的細(xì)胞或組織:
a. 對于細(xì)胞或組織樣品,固定后,適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色,則先進(jìn)行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst 33258染色。如果不需要進(jìn)行其它染色,則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst 33258染色。
b. 對于貼壁細(xì)胞或組織切片,加入少量Hoechst 33258染色液,覆蓋住樣品即可;對于懸浮細(xì)胞,至少加入待染色樣品體積3倍的染色液,混勻。室溫放置3-5分鐘。
c. 吸除Hoechst 33258染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。
d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細(xì)胞發(fā)生凋亡時,會看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。
2. 對于活細(xì)胞或組織:
a. 加入適當(dāng)量Hoechst 33258染色液,必須充分覆蓋住待染色的樣品,通常對于六孔板一個孔需加入1ml染色液,對于96孔板一個孔需加入100微升染色液。
b. 在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的溫度下培養(yǎng)20-30分鐘。棄染色液,用PBS或培養(yǎng)液洗滌2-3次即可進(jìn)行熒光檢測。
相關(guān)文獻(xiàn):
《Protective effect of 17β-estradiol on hydrogen peroxide induced apoptosis of rat nucleus pulposus cells》 作者:Sheng-Hua Ning, Si-Dong Yang, Xu Zhang, Huan-Liu, Hai-Kun Wei, Hai-Ying Wang, Da-Long Yang, Wen-Yuan Ding 期刊:CLINICAL 影響因子:0.848 PMID:
《Protein kinase Cα inhibits myocardin-induced cardiomyocyte hypertrophy through the promotion of myocardin phosphorylation》 作者:Weizong Li, Nan Wang, Man Li, Huiqin Gong, Xinghua Liao, Xiaolong Yang , Tongcun Zhang 期刊:Acta Biochimica et Biophysica Sinica 影響因子:1.807 PMID:26206583