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北京索萊寶科技有限公司
產(chǎn)品展廳
CA1080 支原體檢測試劑盒
  • 英文名稱:Mycoplasma Detection Kit
  • 品牌:solarbio
  • 產(chǎn)地:北京
  • 貨號:CA1080
  • 發(fā)布日期: 2019-05-30
  • 更新日期: 2025-07-18
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 北京
品牌 solarbio
貨號 CA1080
英文名稱 Mycoplasma Detection Kit
包裝規(guī)格 100T/200T
純度 現(xiàn)詢客服%
CAS編號
別名 現(xiàn)詢客服
分子式 現(xiàn)詢客服

產(chǎn)品名稱:支原體檢測試劑盒
 
貨號:CA1080
 
保存:4℃保存,有效期為 2 年,Hoechst 工作液需要避光保存。
 
產(chǎn)品內(nèi)容:
Hoechst 33258工作液     50ml
 
固定液            50ml
 
抗熒光衰減封片液        10ml
 
說明書              1 份
產(chǎn)品簡介
本試劑盒是利用熒光染料(bisbenzimide,Hoechst 33258)檢測支原體污染。這種染料會結合到 DNA的 A-T 富
集區(qū)域,因為支原體的 DNA 中 A-T 含量高(55%~80%),所以可將其染色而被檢測到。被支原體污染的
細胞經(jīng)染色后在細胞周圍可看到許多大小均一的熒光小點,即為支原體的 DNA染色斑,說明有支原體污染。
Hoechst 33258 的*激發(fā)波長為 346nm,*發(fā)射波長為 460nm;Hoechst 33258 和雙鏈DNA結合后,*
激發(fā)波長為 352nm,*發(fā)射波長為 461nm。
 
 
操作步驟: 
貼壁細胞:
1、被檢細胞接種于無菌的 6 孔細胞培養(yǎng)板中,接種密度為 1-2×104
。同時,接種正常無支原體感染的同種細胞,作為陰性對照。
2、5 天后,先吸去培養(yǎng)液,再加入 1ml 的固定液,靜置 20min,
3、吸去固定液,晾干。
4、于每孔中,加入 1ml 的 Hoechst33258 工作液(Hoechst 33258 工作液須覆蓋全部被檢細胞),37℃避光放置 15-20min 或室溫靜置 20~30min。
5、吸去 Hoechst 33258 工作液,加入 2ml 滅菌超純水洗滌三次,直接風干。風干后加入一滴封片液,并以蓋玻片覆蓋。
6、熒光顯微鏡觀察。用紫外激發(fā)光激發(fā),觀察細胞周圍是否有藍色熒光小點或串珠狀熒光小點。 懸浮細胞:
1、收集需檢測的細胞,1500rpm,5min。
2、將收集的細胞涂片于載玻片上,再加 1ml 的固定液,靜置 20min。
3、吸去固定液,晾干。
4、于每孔中,加入 1ml 的 Hoechst33258 工作液(Hoechst 33258 工作液須覆蓋全部被檢細胞),37℃避光放置 15~20min 或室溫靜置 20~30min。
5、吸去 Hoechst 33258 工作液,用無菌水洗滌玻片 3 次,直接風干。風干后加入一滴封固液,并以蓋玻片覆蓋。
6、熒光顯微鏡觀察。用紫外激發(fā)光激發(fā),觀察細胞周圍是否有藍色熒光小點或串珠狀熒光小點。
 
結果判斷(參考):
陰性:僅見細胞的細胞核呈現(xiàn)黃綠色熒光。
陽性:除細胞外,細胞周圍可見大量的大小均一的熒光著色顆粒。
 
注意事項:
1.Hoechst工作液對人體有害,請注意防護。
2.固定液有刺激性氣味,建議在通風櫥進行固定。
3.支原體檢測時,*用不含抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng) 2~3 代,這樣容易避免假陰性結果。
4.本試劑盒用于 6 孔板檢測時,可以進行 50 次檢測反應。
5.檢測支原體污染,可以使用支原體高效 Vero 細胞, 這樣可以提高檢測靈敏度,即將被檢測樣品接種于 Vero
細胞進行檢測。
 
相關產(chǎn)品:
P2100   10×多聚賴氨酸
S2100   抗熒光衰減封片劑
C0020   Hoechst 33258染色液(即用型)
 
 
 
 
       

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