脲酶（UE）活性檢測試劑盒 可見分光光度法
- 發(fā)布日期： 2019-05-23
- 更新日期： 2025-07-16
產(chǎn)品詳請
| 產(chǎn)地 |
北京
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| 品牌 |
Solarbio
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| 貨號 |
BC4110
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| 保存條件 |
2-8℃保存
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| 英文名稱 |
Urease (UE) activity detection kit
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| CAS編號 |
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| 保質(zhì)期 |
1年
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脲酶（UE）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
英文名稱：Urease (UE) activity detection kit
關(guān)鍵詞：脲酶活性檢測|脲酶活性測定|脲酶|UE|UE活性檢測
注意：正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
貨號：BC4110
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體30mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：粉劑×1瓶，4℃保存，臨用前加6mL蒸餾水充分溶解；
試劑二：液體25mL×1瓶，4℃避光保存；
試劑三 A 液：液體 1mL×1 支，4℃保存；
試劑三 B 液：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；臨用前將 A 液倒入 B 液中混合，待用；
試劑四：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
標準品：液體 1mL×1 支，4℃保存。1mg/mL 氮標準液。
產(chǎn)品說明：
脲酶（UE）廣泛分布于植物的種子中，也存在于動物的血液和尿液中，某些微生物也能分泌脲
酶。UE能夠水解尿素產(chǎn)生氨和碳酸，對尿素轉(zhuǎn)化起關(guān)鍵作用。利用靛酚藍比色法測定脲酶水解尿素
產(chǎn)生的NH3-N來反應(yīng)UE活性。
自備實驗用品及儀器：
可見分光光度計、天平、研缽/勻漿器、低溫離心機、1ml玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
操作步驟：
一、樣品處理
1. 組織：按照質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5-10 的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL提取液），冰上勻漿后于4℃，12000g 離心15min，取上清待測。
2. 細胞/細菌：按照細胞/細菌數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500-1000：1 的比例（建議500萬個細胞加入1mL 提取液），冰浴超聲波破碎（功率300w，超聲3 s，間隔7 s，總時間3min）；
然后4℃，12000g 離心15min，取上清置于冰上待測。
3. 血清（漿）或其它液體：直接檢測。
二、測定操作：
1、可見分光光度計預(yù)熱 30min，波長調(diào)至 630nm，蒸餾水調(diào)零。
2、將 1mg/mL 氮標準液用蒸餾水稀釋至 2μg/mL 備用。
3、加樣表：
試劑名稱（μL） 空白管 標準管 測定管 對照管
樣品 - - 100 100
蒸餾水 - - - 200
試劑一 - - 200 -
試劑二 - - 400 400
充分混勻，于 37℃反應(yīng) 1h，
反應(yīng)混合液 - - 400 400
蒸餾水 400 - - -
標準液 - 400 - -
試劑三 80 80 80 80
試劑四 60 60 60 60
混勻，室溫靜止 20min。
蒸餾水 460 460 460 460
充分混勻后測定 630nm 處吸光值，記為 A 空白管、A 標準管、A 測定管和 A 對照管。計
算?A 標準=A 標準管-A 空白管，?A 測定=A 測定管-A 對照管。
三、計算公式：
1、液體中UE活力的計算：
單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘產(chǎn)生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。
UE（U/mL）=?A測定÷?A標準×C標準品×V酶促÷V樣÷T=0.233×?A測定÷?A標準。
2、組織、細菌或細胞中UE活力的計算：
（1）按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘產(chǎn)生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。
UE活力（U/mg prot）=?A測定÷?A標準×C標準品×V酶促÷(V樣×Cpr)÷T=0.233×?A測定÷?A標準÷Cpr。
（2）按樣本鮮重計算：
單位的定義：每g組織每分鐘產(chǎn)生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。
UE活力（U/g鮮重）=?A測定÷?A標準×C標準品×V酶促÷(W× V樣÷V提取)÷T=0.233×?A測定÷?A標準÷W。
（3）按細菌或細胞密度計算：
單位的定義：每1百萬個細菌或細胞每分鐘產(chǎn)生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。
UE活力（U /106 cell）=?A測定÷?A標準×C標準品×V酶促÷(細胞數(shù)量×V樣÷V提取) ÷T=0.233×?A測定÷?A標準÷細胞數(shù)量。
C標準液：標準液濃度，2 μg/mL；
T：反應(yīng)時間，60min；
V酶促：酶促反應(yīng)體系總體積，0.7mL；
V樣：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.1mL；
V提?。禾崛∫后w積，1mL；
Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；
W：樣本質(zhì)量，g；
細胞數(shù)量：以百萬計。
注意事項：
1. ?A測定大于1時，建議將反應(yīng)混合液用蒸餾水稀釋或者樣品用蒸餾水稀釋后再進行測定
