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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號(hào) | BC2145 |
| 用途 | |
| 英文名稱(chēng) | Tissue and blood alkaline phosphatase (AKP/ALP) activity assay kit |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 1年 |
| 是否進(jìn)口 |
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體60mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體5mL×1瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體5mL×1瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體15mL×1瓶，4℃避光保存，變成藍(lán)綠色不能使用。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體1mL×1支，2μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液，4℃保存。
產(chǎn)品說(shuō)明：
AKP/ALP是一種含鋅的糖蛋白酶，在堿性環(huán)境中可水解各種天然及人工合成的磷脂單酯化合物。AKP/ALP廣泛分布于人體各臟器中，以*為主。
在堿性環(huán)境中，AKP/ALP催化磷酸苯二鈉生成游離酚；酚與4-氨基安替比林和鐵qing化鉀反應(yīng)紅色亞醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通過(guò)測(cè)定510 nm吸光度增加速率，來(lái)計(jì)算AKP活性。
自備儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、冰和蒸餾水。
操作步驟：
粗酶液提取：
稱(chēng)取約0.1g組織，加提取液1mL充分研磨，4℃，10000rpm離心10min，取上清液待測(cè)。血液可直接用于測(cè)定，或者適當(dāng)稀釋后用于測(cè)定。
測(cè)定操作：
1.分光光度計(jì)預(yù)熱30 min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到510 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑一置于37℃水浴中預(yù)熱30 min以上。
| 試劑名稱(chēng)（μL） | 測(cè)定管 | 對(duì)照管 | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 |
| 蒸餾水 | - | - | 4 | - |
| 2μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)品 | - | - | - | 4 |
| 上清液 | 4 | - | - | - |
| 試劑一 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 試劑二 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 混勻后置于37℃水浴中保溫15min | ||||
| 試劑三 | 120 | 120 | 120 | 120 |
| 上清液 | - | 4 | - | - |
| 混勻后于510 nm測(cè)定吸光度，分別記為A測(cè)定管、A對(duì)照管、A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管。 | ||||
三、AKP/ALP活性計(jì)算：
1.按蛋白濃度計(jì)算
活性單位定義：37℃中每毫克蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1 μmol酚為一個(gè)酶活力單位。
AKP/ALP (U/mg prot)= [C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V樣]÷(Cpr×V樣)÷T
=0.133×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管) ÷Cpr
2.按樣本鮮重計(jì)算
活性單位定義：37℃中每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1 μmol酚為一個(gè)酶活力單位。
ACP活力(U/g鮮重)= [C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V樣] ÷(W÷V提取×V樣)÷T=0.133×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管) ÷W
3.血液中ACP活性計(jì)算
活性單位定義：37℃中每毫升血液每分鐘催化產(chǎn)生1μmol酚為一個(gè)酶活力單位。
ACP活力(U/mL)= [C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V樣] ÷V樣÷T
=0.133×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)
C標(biāo)準(zhǔn)品：2μmol/mL；V反總：反應(yīng)體系總體積（mL），1020μL=1.02mL； V樣：加入反應(yīng)體系中上清液體積（mL），0.02mL；T：反應(yīng)時(shí)間（min），15 min；V提?。杭尤胩崛∫后w積，1mL；W：樣本鮮重，g；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL。
相關(guān)文獻(xiàn)：
《Role of FGF-2 Transfected Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in Engineered Bone Tissue for Repair of Avascular Necrosis of Femoral Head in Rabbits》 作者:Zhang F,Peng W,Wang L,Zhang J, Dong W, Wu J, Zhang H,Wang J,Zhao Y 期刊: cellular physiology and biochemistry 影響因子: PMID:30184529
《Surface modification of titanium with hydroxyapatite layer induced by phase-transited lysozyme coating》 作者:Jie Yang,Kai Zhang,Kehua Que,Shuai Hou,Zhen Chen,Ying,Li,Yao Wang,Yunjia Song ,Binbin Guan,Wenxin Zhang,Dongwang Zhu,Changyi Li,Dong Wang,Peng Geng,Xu Zhang 期刊:Materials Science and Engineering: C 影響因子:4.959 PMID:30184744
《Experimental research into the potential therapeutic effect of GYY4137 on Ovariectomy-induced osteoporosis》 作者:Zhong-Shi Xu, Feng Dai, Ji Chen, Meng Lv, Ji-Wu Cheng, Xiao-Ming Zhang & Bo-Wen Lin 期刊:Cellular & Molecular Biology Letters 影響因子:3.367 PMID:30305826
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《Chlorpyrifos-induced reproductive toxicity in rats could be partly relieved under high-fat diet》 作者:Jinwang Li,Guofang Pang,Fazheng Ren,Bing Fang 期刊:Chemosphere 影響因子:5.108 PMID:31078036
