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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號(hào) | BC2135 |
保存條件 | 2-8℃保存 |
英文名稱 | Tissue and blood acid phosphatase (ACP) activity assay kit |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 1年 |
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣 產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價(jià)格:400
庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字: 酸性磷酸酶檢測(cè)試劑盒|ACP檢測(cè)試劑盒|組織及血液酸性磷酸酶|試劑盒
簡(jiǎn)要介紹:
ACP在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無(wú)機(jī)磷酸,常見于巨噬細(xì)胞的溶酶體內(nèi)。ACP常用于前列腺癌的輔助診斷。
在酸性環(huán)境中,ACP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚,苯酚與4-氨基安替和鐵qing化鉀反應(yīng)生成紅色亞醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通過測(cè)定510nm吸光度增加速率,來計(jì)算ACP活性。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體10mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體10mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體30mL×1瓶,4℃避光保存,變成藍(lán)綠色不能使用。
標(biāo)準(zhǔn)品:液體1mL×1支,1μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存。
產(chǎn)品說明:
ACP在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無(wú)機(jī)磷酸,常見于巨噬細(xì)胞的溶酶體內(nèi)。ACP常用于前列腺癌的輔助診斷。
在酸性環(huán)境中,ACP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚,苯酚與4-氨基安替和鐵qing化鉀反應(yīng)生成紅色亞醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通過測(cè)定510nm吸光度增加速率,來計(jì)算ACP活性。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、冰和蒸餾水。
操作步驟:
粗酶液提取:
稱取約0.1g組織,加提取液1mL充分研磨,4℃、10000rpm離心10min,取上清液待測(cè)。血液可直接用于測(cè)定,如果濃度高的話,用提取液稀釋。
測(cè)定操作:
1.分光光度計(jì)預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到510 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑一置于37℃水浴中預(yù)熱30 min以上。
試劑名稱(μL) | 測(cè)定管 | 對(duì)照管 | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 |
蒸餾水 | - | - | 20 | - |
1μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)品 | - | - | - | 20 |
上清液 | 20 | - | - | - |
試劑一 | 40 | 40 | 40 | 40 |
試劑二 | 40 | 40 | 40 | 40 |
混勻后置于37℃水浴中保溫15min | ||||
試劑三 | 120 | 120 | 120 | 120 |
上清液 | - | 20 | - | - |
混勻后于510 nm測(cè)定吸光度,分別記為A測(cè)定管、A對(duì)照管、A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管。 |
三、ACP活性計(jì)算:
1.按蛋白濃度計(jì)算
活性單位定義:37℃中每毫克蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1 μmol酚。
ACP(U/mg pr)= [C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V樣]÷(Cpr×V樣)÷T
=0.033×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管) ÷Cpr
2.按樣本鮮重計(jì)算
活性單位定義:37℃中每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1 μmol酚。
ACP活力(U/g)= [C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V樣] ÷(W÷V提取×V樣)÷T
=0.033×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W
3.血液中ACP活性計(jì)算
活性單位定義:37℃中每毫升血液每分鐘催化產(chǎn)生1μmol酚。
ACP活力(U)= [C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V樣] ÷V樣÷T
=0.033×(A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)
C標(biāo)準(zhǔn)品:0.5μmol/mL; V樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積(mL),0.1mL;V樣總:1mL;T:反應(yīng)時(shí)間(min),15 min;V提?。杭尤胩崛∫后w積,1mL;W:樣本鮮重,g。