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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號 | BC2355 |
| 保存條件 | 2-8℃保存 |
| 英文名稱 | Acyltransferase (AAT) activity assay kit |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 1年 |
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣 產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存； 參考價(jià)格：6400
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關(guān)鍵字: ： 酰基轉(zhuǎn)移酶檢測試劑盒|AAT檢測試劑盒| ?；D(zhuǎn)移酶|試劑盒
簡要介紹：
AAT是一個(gè)多功能蛋白大家族，主要負(fù)責(zé)催化生物體內(nèi)各種?；腿ヵ；磻?yīng)，在基因表達(dá)、代謝和信號傳導(dǎo)中具有重要作用。
AAT催化乙酰CoA轉(zhuǎn)移乙酰基到丁醇，同時(shí)還原DTNB生成TNB；TNB在412nm有吸收峰，測定412 nm吸光度增加速率，來計(jì)算AAT活性。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體100 mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體15 mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存。臨用前加蒸餾水1mL充分溶解，4℃保存。
試劑三：液體2 mL×1瓶，4℃保存。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加入試劑一1mL充分溶解，4℃避光保存.
產(chǎn)品說明：
AAT是一個(gè)多功能蛋白大家族，主要負(fù)責(zé)催化生物體內(nèi)各種?；腿ヵ；磻?yīng)，在基因表達(dá)、代謝和信號傳導(dǎo)中具有重要作用。
AAT催化乙酰CoA轉(zhuǎn)移乙酰基到丁醇，同時(shí)還原DTNB生成TNB；TNB在412nm有吸收峰，測定412 nm吸光度增加速率，來計(jì)算AAT活性。
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水
操作步驟：
樣本的前處理：
稱取約0.1g樣品，加提取液1mL，冰上充分研磨，16000g 4℃離心20min，取上清液待測。
測定步驟：
分光光度計(jì)預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長至412nm，蒸餾水調(diào)零。
試劑一在37℃水浴保溫30 min以上。
樣本測定
| 試劑名稱（μL） | 空白管 | 測定管 |
| 蒸餾水 | 20 | - |
| 上清液/血清 | - | 20 |
| 試劑一（預(yù)熱） | 140 | 140 |
| 試劑二 | 10 | 10 |
| 試劑三 | 20 | 20 |
| 試劑四 | 10 | 10 |
將上述試劑按順序加入1 mL 玻璃比色皿中，加試劑四的同時(shí)開始計(jì)時(shí)，在412nm 波長下記錄10s時(shí)的初始吸光度A1 和130s后的吸光值A2，計(jì)算ΔA空= A2空-A1空；ΔA測= A2測-A1測，ΔA=ΔA測-ΔA空。
注：如果△A測偏低，可以延長反應(yīng)時(shí)間，如測定10 s和310 s的吸光度，相應(yīng)修改計(jì)算公式中反應(yīng)時(shí)間。
三、AAT活性計(jì)算：
a.使用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下：
按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位的定義：37℃中每mL反應(yīng)體系下每毫克蛋白每分鐘催化吸光值變化0.001個(gè)單位為1U。。
AAT (U/mg prot) = 1000×ΔA÷(Cpr×V樣) ÷T×（V反總÷1）= 5000×ΔA÷Cpr；
此法需要自行測定樣本蛋白質(zhì)濃度。
按樣本鮮重計(jì)算：
單位的定義：37℃中每mL反應(yīng)體系下每克組織每分鐘催化吸光值變化0.001個(gè)單位為1U。
AAT (U/g 鮮重) = 1000×ΔA÷(V樣÷V樣總×W) ÷T×（V反總÷1）=5000×ΔA÷W
按血清濃度計(jì)算：
單位的定義：37℃中每mL反應(yīng)體系下每mL血清每分鐘催化吸光值變化0.001個(gè)單位為1U。
AAT (U/mL 血清) = 1000×ΔA÷V血清÷T×（V反總÷1）= 5000×ΔA。
Cpr：上清液蛋白濃度，mg/mL；V樣：加入反應(yīng)體系中上清液體積，0.02mL；W ：樣品質(zhì)量；V樣總：提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2min；V血清：0.02mL;V 反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；1：每mL反應(yīng)體系。
