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產(chǎn)品名稱: 植物中脂氧合酶 (LOX)活性檢測試劑盒

產(chǎn)品英文名: Plant Lipoxidase Assay Kit

產(chǎn)品貨號：BC0320        產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓

產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣       產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：760
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字: ：  脂氧合酶檢測試劑盒|LOX檢測試劑盒|植物中脂氧合酶|脂氧合酶|試劑盒

簡要介紹：
OX廣泛存在于植物組織中，催化不飽和脂肪酸氧化反應(yīng)，導(dǎo)致膜脂過氧化。在植物的生長發(fā)育、成熟衰老及逆境脅迫過程中具有重要作用。 
    LOX催化亞油酸氧化，氧化產(chǎn)物在234nm處有特征吸收峰；測定234nm吸光度增加速率，來計算LOX活性。 

產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存。含不溶性物質(zhì)，使用前混勻即可。
試劑一：液體45mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入5mL試劑一，充分溶解，滴加0.1mL 0.2mol/L NaOH至溶液澄清。

產(chǎn)品說明：
    LOX廣泛存在于植物組織中，特別是黃豆種子中。LOX催化不飽和脂肪酸氧化反應(yīng)，導(dǎo)致膜脂過氧化。在植物的生長發(fā)育、成熟衰老及逆境脅迫過程中具有重要作用。
    LOX催化亞油酸氧化，氧化產(chǎn)物在234nm處有特征吸收峰；測定234nm吸光度增加速率，來計算LOX活性。
自備儀器和用品：
    研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。

操作步驟：
一、粗酶液提?。?/span>
稱取約0.1g樣品，加提取液1mL，冰上充分研磨，16000g 4℃離心20min，取上清液置冰上待測。
二、測定：
1. 分光光度計預(yù)熱30 min以上，調(diào)節(jié)波長到234 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑一在25℃水浴中預(yù)熱30 min以上。
3. 空白管：依次在1mL石英比色皿中加入100μL蒸餾水、800μL試劑一和100μL試劑二，迅速混勻后于234nm比色，記錄15s和75s的吸光值，分別記為A1和A2。
4. 測定管：依次在1mL石英比色皿中加入100μL上清液、800μL試劑一和100μL試劑二，迅速混勻后于234nm比色，記錄15s和75s的吸光值，分別記為A3和A4。
三、LOX活性計算：
（1）按蛋白濃度計算
活性單位定義：在1mL體系下，25℃中每毫克蛋白每分鐘催化吸光值變化0.001個單位為1U。
LOX (U/mg prot) = [(A4－A3)－(A2－A1)]÷0.001÷(Cpr×V樣)÷T×V反總
 = 10000×[(A4－A3)－(A2－A1)]÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
活性單位定義：在1mL體系下，25℃中每克樣品每分鐘催化吸光值變化0.001個單位為1U。

LOX (U/g鮮重) = [(A4－A3)－(A2－A1)]÷0.001÷(V樣÷V樣總×W)÷T×V反總
= 10000×[(A4－A3)－(A2－A1)]÷W
    Cpr：上清液蛋白濃度，mg/mL，需另外測定，建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量檢測試劑盒；W：樣品質(zhì)量，g；V樣：加入反應(yīng)體系中上清液體積，100μL=0.1mL；V樣總：上清液總體積，1mL；T：反應(yīng)時間，1min；V反總：反應(yīng)體系總體積，1mL。
注意事項：
1．試劑三易自發(fā)氧化，從而導(dǎo)致空白管測定值偏高，必須臨用前配制。
2．樣品處理等過程均需要在冰上進行，且須在當(dāng)日完成酶活性測定。
3．正式實驗前做1~2個預(yù)實驗，保證?A的值在0.02~1.2范圍內(nèi)；若反應(yīng)后為明顯的懸濁液，則需稀釋后再測。