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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號 | BC1190 |
用途 | |
英文名稱 | Glutathione Peroxidase (GPX) Assay Kit |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 1年 |
是否進口 |
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣 產(chǎn)品商標:solarbio
保存與運輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價格:1600
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字:谷胱甘肽過氧化物酶試劑盒|活性檢測試劑盒|GPX含量檢測|試劑盒|
簡要介紹:
氧化型谷胱甘肽(GSSG)是谷胱甘肽(GSH)的氧化形式,又稱為二硫代谷胱甘肽,是兩分子的谷胱甘肽氧化而成。GSSG會被谷胱甘肽還原酶還原成GSH,因此機體中大多數(shù)是以還原型形式存在。測定細胞內(nèi)GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,能夠很好地反映細胞所處的氧化還原狀態(tài)。本試劑盒利用谷胱甘肽能和5,5’-二硫代-雙-(2-硝基ben甲酸)(5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid,DTNB)反應(yīng)產(chǎn)生2-硝基-5-巰基ben甲酸,2-硝基-5-巰基ben甲酸在波長412nm處具有*光吸收的特點,通過2-乙烯吡dian抑制樣品中原有的還原型谷胱甘肽,然后利用谷胱甘肽還原酶將GSSG還原為GSH,借此測定氧化型谷胱甘肽的含量。
產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體×1支,-20℃保存。
試劑四:液體×1瓶,4℃保存。
工作液配制:臨用前,在試劑二中加入試劑一40 mL,充分震蕩溶解后加入全部試劑三,混勻。(當天用完)
產(chǎn)品說明:
谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)中催化還原型谷胱甘肽(GSH)氧化的主要酶之一。GSH-Px不僅能夠特異地催化還原型谷胱甘肽與ROS反應(yīng),生成氧化型谷胱甘肽GSSG,從而保護生物膜免受ROS的損害,維持細胞的正常功能;而且具有保護*、提高機體免疫力、拮抗有害金屬離子對機體的傷害和增加機體抗輻射等能力。
GSH-Px催化H2O2氧化GSH,產(chǎn)生GSSG;谷胱甘肽還原酶(GR)催化NADPH還原GSSG,再生GSH,同時NADPH氧化生成NADP+;NADPH在340 nm有特征吸收峰,而NADP+沒有;可以通過測定340 nm光吸收減少速率來計算GSH-Px活性。
自備儀器和用品:
紫外-可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、1mL石英比色皿和蒸餾水。
操作步驟:
一、粗酶液提?。?/span>
組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10 的比例(建議稱取0.1g 組織,加入1mL 試劑一)進行冰浴勻漿。10000rpm,4℃離心10min,取上清置冰上待測(如上清不清澈,再離心3min)。
細菌、真菌:按照細胞數(shù)量104個:試劑一體積(ml)500~1000:1 的比例,建議500 萬細胞加入1mL 試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3 s,間隔7s,總時間3min)然后10000rpm,4℃,離心10min,取上清置冰上待測(如上清不清澈,再離心3min)。
血清等液體:直接測定。
二、GSH-Px測定操作:
1. 分光光度計預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 混合試劑在25℃或者37℃(哺乳動物)水浴中預(yù)熱30min以上。
3. 空白管:依次在1mL石英比色皿中加入100μL蒸餾水、800μL預(yù)熱的工作液,100μL試劑四,迅速混勻后于340nm處測定第10 s處的吸光值,37℃水浴3min后迅速拿出測量吸光度,分別記為A空1和A空2。計算△A空=A空1-A空2。(空白管只需做1~2個)
4. 測定管:依次在1mL石英比色皿中加入100μL上清液、800μL預(yù)熱的工作液,100μL試劑四,迅速混勻后于340nm處測定第10 s處的吸光值,37℃水浴3min后迅速拿出測量吸光度,分別記為A測1和A測2。計算△A測=A測1-A測2。
相關(guān)文獻:
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《Cell death induced by α-terthienyl via reactive oxygen species-mediated mitochondrial dysfunction and oxidative stress in the midgut of Aedes aegypti larvae》 作者:JieZhangaShakilAhmadaLan-YingWangaQianHanbJian-ChunZhangaYan-PingLuo 期刊:Free Radical Biology and Medicine 影響因子:5.657 PMID:31022448