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產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內容： 
試劑一：液體100mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：液體20mL×1瓶，4℃保存；
試劑三：液體×1瓶，4℃保存。臨用前加入2.5mL試劑二，混勻；
標準品：粉劑×1瓶（棕色），4℃保存。臨用前配置，加入5.679mL蒸餾水充分溶解；吸取0.01mL上述溶液，加入0.99mL蒸餾水，混勻，即100μmol/L AsA。
產(chǎn)品說明:
AsA 又稱維生素c。AsA 是輔酶、自由基清除劑、電子共體/受體和草酸鹽與酒石酸鹽生物合成的底物等。作為植物細胞中最重要的抗氧化劑，AsA 在保護葉綠體免于氧化損傷起著舉足輕重的作用，也是衡量農(nóng)作物產(chǎn)品品質的重要指標之一。 
抗壞血酸氧化酶（AAO）催化 AsA 氧化生成 DHA，通過測定 AsA 的氧化速率，即可計算出 AsA 含量。 
自備儀器和用品：
研缽、冰、低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板（UV板）、可調式移液器、蒸餾水。
操作步驟：

• 樣品中 AsA 提?。?/span> 

1.   組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 試劑一）進行冰浴勻漿。8000g，4℃離心 20min，取上清置冰上待測。 
2.  細菌、真菌：按照細胞數(shù)量（10 個）：試劑一體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議500 萬細胞加入 1mL 試劑一），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；8000g，4℃離心 20min，取上清液置冰上混勻待測。 
3.   血清等液體：直接測定。 

• AsA 測定操作： 

1.  分光光度計預熱 30 min，調節(jié)波長到 265 nm，蒸餾水調零。 
2.  試劑二在 25℃水浴鍋中預熱 30 min。 
3.  標準管：依次在比色皿中加入 100μL 標準液、800μL 試劑二和 100μL 試劑三，迅速混勻，在 265nm 測定，記錄 30s 和 150s 的吸光值 A1 和 A2，△A 標準管= A1 －A2。 
4.  測定管：依次在比色皿中加入 100μL 上清液、800μL 試劑二和 100μL 試劑三，迅速混勻，在 265nm 測定，記錄 30 s 和 150s 的吸光值 A3 和 A4，△A 測定管= A3 －A4。 
注意：標準管只需測定一次。 

• AsA 含量計算公式:

1. 按蛋白濃度計算 

AsA (nmol/mg prot) =[C 標準液×△A 測定管÷△A 標準管×V 標準]÷（Cpr×V 樣） 
=100×△A 測定管÷△A 標準管÷Cpr

2. 按樣本質量計算 

AsA(nmol/g) =[C 標準液×△A 測定管÷△A 標準管×V 標準]÷(W×V 樣÷V 樣總)
=100×△A 測定管÷△A 標準管÷W

3. 按細胞數(shù)量計算 

AsA(nmol/10⁴ cell) =[C 標準液×△A 測定管÷△A 標準管×V 標準]÷(細胞數(shù)量×V 樣÷V 樣總)
=100×△A 測定管÷△A 標準管÷細胞數(shù)量 
（4）按液體體積計算 
AsA (nmol/mL) =[C 標準液×△A 測定管÷△A 標準管×V 標準]÷V 樣 
=100×△A 測定管÷△A 標準管 
C 標準液：100μmol/L；V 標準：標準液體積，0.1mL；V 樣總：上清液總體積，1.0 mL=0.001 L；V 樣：加入反應體系中上清液體積，0.1mL；Cpr  ：蛋白含量，mg/mL；W：樣品質量，g。 
注意事項：

1. 試劑三和標準品現(xiàn)配現(xiàn)用，配制好的 4℃保存，3 天內使用完。 

2. *檢出限為 10μ mol/L。 

相關文獻：
《Effect of 1α, 25-dihydroxyvitamin D3 on the osteogenic differentiation of human periodontal ligament stem cells and the underlying regulatory mechanism》 作者:Yawen Ji， Panpan Zhang， Yixiao Xing， Linglu Jia， Yunpeng Zhang， Tingting Jia， Xuan Wu， Bin Zhao， Xin Xu 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影響因子:2.928 PMID:30365053