|
| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號(hào) | BC0095 |
| 用途 | POD（EC 1.11.1.7）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，可催化過(guò)氧化氫氧化酚類和胺類化合物，具有消除過(guò)氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。 |
| 英文名稱 | Peroxidase (POD) detection kit |
| 包裝規(guī)格 | 100管/96樣 |
| 純度 | 現(xiàn)詢客服% |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 1年 |
| 是否進(jìn)口 | 否 |
產(chǎn)品名稱：過(guò)氧化物酶（POD）檢測(cè)試劑盒 微量法
產(chǎn)品英文名：Micro Peroxidase (POD) Assay Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：BC0095 產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣 產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存； 參考價(jià)格：720
庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關(guān)鍵字：過(guò)氧化物酶試劑盒
簡(jiǎn)要介紹：
POD廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，可催化過(guò)氧化氫氧化酚類和胺類化合物，具有消除過(guò)氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。POD催化H2O2氧化特定底物，在470nm有特征光吸收。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
| 商品貨號(hào)： | 商品品牌： | 規(guī)格 | 基本售價(jià)： | 選擇規(guī)格 |
| BC0095-100管/96樣 | 720.00元 |  |
試劑的組成：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 20mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 0.2mL×1 瓶，4℃保存；用時(shí)每瓶加入 3mL 試劑一，現(xiàn)配現(xiàn)用，可 4℃保存一周；
試劑三：液體 3mL×1 瓶，4℃保存。
產(chǎn)品說(shuō)明：
POD（EC1.11.1.7）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物中，可催化過(guò)氧化氫氧化酚類和胺類化合物，具有消除過(guò)氧化氫和酚類、胺 類毒性的雙重作用。POD 在有過(guò)氧化氫存在的情況下，能使愈創(chuàng)木酚發(fā)生氧化，生成茶褐色物質(zhì)，該物質(zhì)在 470nm 有*光吸收。
需自備的儀器和用品： 可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水
操作步驟：
一、粗酶液提?。?/span>
1、 細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備： 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液），超聲 波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 8000g4℃離心 10min， 取上清，置冰上待測(cè)。 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2、 血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。
二、測(cè)定步驟和加樣表：
1、 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 470nm，分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。 2、 測(cè)定前將試劑一、二和三在 37℃（哺乳動(dòng)物）或 25℃（其它物種）放置 10min 以上。 3、 樣本測(cè)定表
| 試劑名稱（μL） | 測(cè)定孔 |
| 樣本 | 5 |
| 蒸餾水 | 60 |
| 試劑一 | 120 |
| 試劑二 | 30 |
| 試劑三 | 30 |
在 EP 管中按順序加入上述試劑，立即混勻并計(jì)時(shí)，立即取 200μL 轉(zhuǎn)移至微量玻璃比色皿或 96 孔板中，記錄 470nm 下 30s 時(shí)的吸光 值 A1 和 1min30s 后的吸光值 A2。計(jì)算ΔA＝A2-A1。
POD 活性計(jì)算：
用微量玻璃比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
血清（漿）POD 活性
單位的定義：每 mL 血清（漿）在每 mL 反應(yīng)體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個(gè)酶活力單位。
POD（U/mL）＝245μL（反應(yīng)體系）÷1000μL×血清（漿）總體積（1000μL）÷樣本體積（5μL）÷0.01×ΔA=4900×ΔA
2、組織 POD 活性
(1) 按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義：每 mg 組織蛋白在每 mL 反應(yīng)體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個(gè)酶活力單位。
POD（U/mgprot）＝245μL（反應(yīng)體系）÷1000μL×提取酶液總體積（1000μL）÷樣本體積（5μL）÷0.01×ΔA 測(cè)定÷蛋白質(zhì)濃度（mg/mL） =4900×ΔA÷蛋白質(zhì)濃度（mg/mL）
（2）按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義：每 g 組織在每 mL 反應(yīng)體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個(gè)酶活力單位。
POD（U/g 鮮重）＝245μL（反應(yīng)體系）÷1000μL×提取酶液總體積（1000μL）÷樣本體積（5μL）÷0.01×ΔA÷樣品質(zhì)量（g/mL）=4900×ΔA÷ 樣品質(zhì)量（g/mL）
3、細(xì)菌或細(xì)胞 POD 活性
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義：每 mg 組織蛋白在每 mL 反應(yīng)體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個(gè)酶活力單位。
POD（U/mgprot）＝245μL（反應(yīng)體系） ÷1000μL×提取酶液總體積（1000μL） ÷樣本體積（5μL） ÷0.01×ΔA÷蛋白質(zhì)濃度（mg/mL） =4900×ΔA÷ 蛋白質(zhì)濃度（mg/mL）
（2）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算
單位的定義：每 1 萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在每 mL 反應(yīng)體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個(gè)酶活力單位。
POD（U/104cell）＝245μL（反應(yīng)體系）÷1000μL×提取酶液總體積（1000μL）÷樣本體積（5μL）÷0.01×ΔA÷細(xì)菌或細(xì)胞密度（104 cell/mL） =4900×ΔA÷細(xì)菌或細(xì)胞密度（104 cell/mL）
用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
血清（漿）POD 活性
單位的定義：每 mL 血清（漿）在每 mL 反應(yīng)體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個(gè)酶活力單位。
POD（U/mL）＝245μL（反應(yīng)體系）÷1000μL×血清（漿）總體積（1000μL）÷樣本體積（5μL）÷0.005×ΔA=9800×ΔA
2、組織 POD 活性
(1) 按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義：每 mg 組織蛋白在每 mL 反應(yīng)體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個(gè)酶活力單位。
POD（U/mgprot）＝245μL（反應(yīng)體系）÷1000μL×提取酶液總體積（1000μL）÷樣本體積（5μL）÷0.005×ΔA 測(cè)定÷蛋白質(zhì)濃度（mg/mL） =9800×ΔA÷蛋白質(zhì)濃度（mg/mL）
（2）按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義：每 g 組織在每 mL 反應(yīng)體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個(gè)酶活力單位。
POD（U/g 鮮重）＝245μL（反應(yīng)體系）÷1000μL×提取酶液總體積（1000μL）÷樣本體積（5μL）÷0.005×ΔA÷樣品質(zhì)量（g/mL）=9800×ΔA÷ 樣品質(zhì)量（g/mL）
3、細(xì)菌或細(xì)胞 POD 活性
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義：每 mg 組織蛋白在每 mL 反應(yīng)體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個(gè)酶活力單位。
POD（U/mgprot）＝245μL（反應(yīng)體系） ÷1000μL×提取酶液總體積（1000μL） ÷樣本體積（5μL） ÷0.005×ΔA÷蛋白質(zhì)濃度（mg/mL） =9800×ΔA÷ 蛋白質(zhì)濃度（mg/mL）
（2）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算
單位的定義：每 1 萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在每 mL 反應(yīng)體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個(gè)酶活力單位。
POD（U/104 cell）＝245μL（反應(yīng)體系）÷1000μL×提取酶液總體積（1000μL）÷樣本體積（5μL）÷0.005×ΔA÷細(xì)菌或細(xì)胞密度（104cell/mL） =9800×ΔA÷細(xì)菌或細(xì)胞密度（104 cell/mL）
注意事項(xiàng)：
1、 如一次測(cè)定的樣本數(shù)量較多，可將試劑一、二、三和蒸餾水按照比例混合，在 37℃（哺乳動(dòng)物）或 25℃（其它物種）放置 10min， 測(cè)定時(shí)加入 240μL 即可。
2、 樣本測(cè)定值如果小于 0.005，可將反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng)到 3-5 分鐘，計(jì)算時(shí)除以反應(yīng)時(shí)間即可；如果高于 0.5，可將樣本用提取液進(jìn)行 稀釋。計(jì)算時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)即可。
相關(guān)文獻(xiàn)：
《Effect of L-Arginine on Maintaining Storage Quality of the White Button Mushroom (Agaricus bisporus)》 作者:Beibei Li，Yang Ding，Xiuli Tang，Guoyi Wang，Shujuan Wu，Xianxian Li，Xiaofei Huang，Tongtong Qu，Jifeng Chen 期刊:Food and Bioprocess Technology 影響因子:3.032 PMID:
《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作者:Yanan Wang,Chengzhen Liang,Zhigang Meng,Yanyan Li,Peilin Wang,Yuan Wang,Guoqing Sun,Yongping Cai,Shou-Yi Chen,Yi Lin,Rui Zhang,Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影響因子:3.712 PMID:
《The Fight Against Panax notoginseng Root-Rot Disease Using Zingiberaceae Essential Oils as Potential Weapons》 作者:Yan-Jiao Yin, Chuan-Jiao Chen, Shi-Wei Guo, Ke-Ming Li, Yu-Nan Ma, Wu-Mei Sun, Fu-Rong Xu, Yong-Xian Cheng and Xian Dong 期刊:Frontier in Immunology 影響因子:4.716 PMID:30337932
