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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號(hào) | BC1895 |
| 用途 | |
| 英文名稱 | Free cholesterol (FC) content test kit |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 1年 |
| 是否進(jìn)口 |
簡(jiǎn)要介紹:
FC是構(gòu)成細(xì)胞膜的主要成分,也是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活性物質(zhì)的重要原料。FC濃度可作為脂代謝的指標(biāo)。
FC氧化酶催化FC生成△4-膽甾烯酮和H2O2,過(guò)氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成紅色醌類化合物,在500nm有吸收峰,其顏色深淺與FC含量成正比。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:異丙醇100mL(自備);
工作液:液體20mL×1瓶,4℃保存;
標(biāo)準(zhǔn)品:液體1mL×1支,濃度為0.5 μ mol/mL,4℃保存。
產(chǎn)品說(shuō)明:
FC是構(gòu)成細(xì)胞膜的主要成分,也是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活性物質(zhì)的重要原料。FC濃度可作為脂代謝的指標(biāo)。
FC氧化酶催化FC生成△4-膽甾烯酮和H2O2,過(guò)氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成紅色醌類化合物,在500nm有吸收峰,其顏色深淺與FC含量成正比。
自備儀器和用品:
水浴鍋、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣品中FC提取:
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿。8000g,4℃離心10min,取上清置冰上待測(cè)。
細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲2秒,間隔3秒,總時(shí)間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。
血清(漿)樣品:直接測(cè)定
測(cè)定:
分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到500 nm,蒸餾水調(diào)零。
FC工作液在40℃水浴中預(yù)熱30min。
標(biāo)準(zhǔn)管:依次在微量石英比色皿/96孔板中加入50μL FC標(biāo)準(zhǔn)液和150μL FC工作液,混勻,靜置24h后于500nm測(cè)定A標(biāo)準(zhǔn)管。
測(cè)定管:依次在微量石英比色皿/96孔板中加入50μL FC待測(cè)液和150μL FC工作液,混勻,靜置24h后于500nm測(cè)定A測(cè)定管。
三、FC含量計(jì)算:
血清(漿)中FC含量計(jì)算:
FC含量(μmol/dL)= C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×100mL
=100×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)
C標(biāo)準(zhǔn)液:1μmol/mL;100 mL:1dL=100 mL。
組織中FC含量計(jì)算:
按樣本蛋白濃度計(jì)算
FC含量(μmol/mg prot)= C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr
=(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr
按樣本鮮重計(jì)算
FC含量(μmol/g 鮮重)= C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V樣總÷W
=(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W
C標(biāo)準(zhǔn)液:1μmol/mL;V樣總:加入提取液的體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。
細(xì)胞、細(xì)菌中FC含量計(jì)算:
FC含量(μmol/104cell)=C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷細(xì)菌或細(xì)胞(104 cell/mL)
= (A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷細(xì)菌或細(xì)胞(104cell/mL)
C標(biāo)準(zhǔn)液:1μmol/mL。
注:檢測(cè)下限:0.25μmol/mL
相關(guān)文獻(xiàn):
《Effects of extraction methods on the physicochemical characteristics and biological activities of polysaccharides from okra (Abelmoschus esculentus)》 作者:Qin Yuan,Shang Lin,Yuan Fu,Xi-Rui Nie,Wen Liu,Yan Su,Qiao-Hong Han,Li Zhao,Qing Zhang,De-Rong Lin,Wen Qin ,Ding-Tao Wu 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影響因子:4.784 PMID:30639655
《Characterization, in vitro binding properties, and inhibitory activity on pancreatic lipase of β-glucans from different Qingke (Tibetan hulless barley) cultivars》 作者:Huan Guo,Shang Lin,MinLua Jia Duo Bu Gong,Lu Wang,Qing Zhang,De-Rong Lin,Wen Qin,Ding-Tao Wu 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影響因子:4.784 PMID:30195000